1　范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了復(fù)合微生物肥料的定義、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)志、包裝運輸及貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于復(fù)合微生物肥料。
2　規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
　
GB 8170—1987           數(shù)值修約規(guī)則
GB 18877—2002          有機(jī)-無機(jī)復(fù)混肥料
GB/T 1250—1989         極限數(shù)值的表示方法和判定方法
GB/T 19524.1—2004      肥料中糞大腸菌群的測定
GB/T 19524.2—2004      肥料中蛔蟲卵死亡率的測定
NY 525—2002            有機(jī)肥料
3　術(shù)語和定義
復(fù)合微生物肥料是指特定微生物與營養(yǎng)物質(zhì)復(fù)合而成，能提供、保持或改善植物營養(yǎng)，提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量或改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的活體微生物制品。
4　要求
4.1　菌種
使用的微生物應(yīng)安全、有效。生產(chǎn)者須提供菌種的分類鑒定報告，包括屬及種的學(xué)名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)等完整資料，以及菌種安全性評價資料。采用生物工程菌，應(yīng)具有獲準(zhǔn)允許大面積釋放的生物安全性有關(guān)批文。
4.2　成品技術(shù)指標(biāo)
4.2.1　外觀（感官）：產(chǎn)品按劑型分為液體、粉劑和顆粒型。粉劑產(chǎn)品應(yīng)松散；顆粒產(chǎn)品應(yīng)無明顯機(jī)械雜質(zhì)、大小均勻，具有吸水性。
4.2.2　復(fù)合微生物肥料產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)見表1。
                   表1 復(fù)合微生物肥料產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)

4.2.3　復(fù)合微生物肥料產(chǎn)品中無害化指標(biāo)見表2。
              表2  復(fù)合微生物肥料產(chǎn)品無害化指標(biāo)

5　試驗方法
5.1　儀器設(shè)備
5.1.1　生物顯微鏡；
5.1.2　恒溫培養(yǎng)箱；
5.1.3　恒溫干燥箱；
5.1.4　超凈工作臺或潔凈室；
5.1.5　電子天平（或精密天平，下同）；
5.1.6　搖床；
5.1.7　蒸汽滅菌鍋；
5.1.8　試驗篩；
5.1.9　酸度計。
5.2　試劑
方法中所用的試劑，在未注明其它規(guī)格時，均指分析純（A.R.）。
5.2.1　無離子水、無菌水（或生理鹽水，下同）、蒸餾水。
5.2.2　檢測用培養(yǎng)基：根據(jù)所測微生物的種類選用適宜的培養(yǎng)基。
5.3　產(chǎn)品參數(shù)的檢測
5.3.1　外觀(感官)的測定
取少量樣品放到白色搪瓷盤(或白色塑料調(diào)色板)中，仔細(xì)觀察樣品的顏色、形狀、質(zhì)地。
5.3.2　有效活菌數(shù)的測定
5.3.2.1　系列稀釋
稱取固體樣品10 g（精確到0.01 g），加入帶玻璃珠的100 mL的無菌水中(液體樣品用無菌吸管取l0.0 mL加入90 mL的無菌水中)，靜置20 min，在旋轉(zhuǎn)式搖床上200 r/min充分振蕩30 min，即成母液菌懸液（基礎(chǔ)液）。
用5 mL無菌移液管分別吸取5.0mL上述母液菌懸液加入45 mL無菌水中，按1:10進(jìn)行系列稀釋，分別得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀釋的菌懸液（每個稀釋度應(yīng)更換無菌移液管）。
5.3.2.2　加樣及培養(yǎng)
每個樣品取3個連續(xù)適宜的稀釋度，用0.5 mL無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL，加至預(yù)先制備好的固體培養(yǎng)基平板上，分別用無菌玻璃刮 刀將不同稀釋度的菌懸液均勻地涂于瓊脂表面。
每一稀釋度重復(fù)3次，同時以無菌水作空白對照，于適宜的條件下培養(yǎng)。
5.3.2.3　菌落識別
根據(jù)所檢測菌種的技術(shù)資料，每個稀釋度取不同類型的代表菌落通過涂片、染色、鏡檢等技術(shù)手段確認(rèn)有效菌。當(dāng)空白對照培養(yǎng)皿出現(xiàn)菌落數(shù)時，檢測結(jié)果無效，應(yīng)重做。
5.3.2.4　菌落計數(shù)
以出現(xiàn)20~300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)（絲狀真菌為10~150個菌落數(shù)），分別統(tǒng)計有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。當(dāng)只有一個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)在20~300之間時，則以該菌落數(shù)計算。若有兩個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)均在20~300之間時，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值（稀釋度大的菌落總數(shù)×10與稀釋度小的菌落總數(shù)之比）決定，若其比值小于等于2應(yīng)計算兩者的平均數(shù)；若大于2則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計算。有效活菌數(shù)按式（1）計算，同時計算雜菌數(shù)：
             nm = kv1/(m0v2) ×10-8       或  nv = kv1/(v0v2) ×10-8         …………………（1）
式中：
nm — 質(zhì)量有效活菌數(shù)，         億/g
          nv — 體積有效活菌數(shù)，        億/mL
          — 有效菌落平均數(shù)，         個
k — 稀釋倍數(shù)
v1 — 基礎(chǔ)液體積，             mL
v2 — 菌懸液加入量，           mL
v0 — 樣品量，                 mL
m0 — 樣品量，                 g
5.3.3　霉菌雜菌數(shù)的測定
采用馬丁培養(yǎng)基，測定方法同5.3.2。
5.3.4　雜菌率的計算
除樣品有效菌外其它的菌均為雜菌（包括霉菌雜菌）。樣品中雜菌率按式（2）計算：
              m = n1/(n1+n)×100                                       …………………（2）
式中：
m — 樣品雜菌率，              %
            n1 — 雜菌數(shù)，               億/g(mL)
            n — 有效活菌數(shù)，            億/g(mL)
5.3.5　水分的測定
將空鋁盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h，冷卻后稱量記錄空鋁盒的質(zhì)量。然后稱取2份平行樣品，每份20 g（精確到0.01 g），分別加入鋁盒中并記錄質(zhì)量。將裝好樣品的鋁盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。取出置于干燥器中冷卻20 min后進(jìn)行稱量。水分含量按式（3）計算（結(jié)果為兩次測定的平均值）：
         w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100                             …………………（3）
式中：
w — 樣品水分含量，           %
m0 — 空鋁盒的質(zhì)量，           g
m1 — 樣品和鋁盒的質(zhì)量，       g
m2 — 烘干后樣品和鋁盒的質(zhì)量， g
5.3.6　細(xì)度的測定
5.3.6.1　粉劑樣品
稱取樣品50 g（精確到0.1 g），放入300 mL燒杯中，加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔徑2.0 mm的試驗篩中，然后用水沖洗，并用刷子輕輕地刷篩面上的樣品，直至篩下流出清水為止。將試驗篩連同篩上樣品放入干燥箱中，在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。冷卻后稱量篩上樣品質(zhì)量。樣品細(xì)度按式（4）計算：
s  ={1- m1/[ m0（1-w）]} ×100                            …………………（4）
式中：
s  — 篩下樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)，     %
m0  — 樣品質(zhì)量，             g
w   — 樣品含水量，           %
m1  — 篩上干樣品質(zhì)量，       g
5.3.6.2　顆粒樣品
稱取樣品50 g（精確到0.1 g），將兩個不同孔徑的試驗篩（1.0 mm和4.75 mm）摞在一起放在底盤上(大孔徑試驗篩放在上面)。樣品倒入大孔徑試驗篩內(nèi)，篩樣品。然后稱小孔徑試驗篩上的樣品質(zhì)量，顆粒細(xì)度按式（5）計算：
         g = m1 /m0 ×100                                         …………………（5）
式中：
g — 樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)，          %
m1 — 小孔徑試驗篩上樣品質(zhì)量，g
m0 — 樣 品 質(zhì) 量，           g
5.3.7　pH值的測定
打開酸度計電源預(yù)熱30 min，用標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)。
pH值的測定，每個樣品重復(fù)三次，計算三次的平均值。
5.3.7.1　液體樣品
用量筒取40mL樣品放入50 mL的燒杯中，直接用酸度計測定，儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。
5.3.7.2　粉劑樣品
稱取樣品15 g，放入50 mL的燒杯中，按1:2(樣品:無離子水)的比例將無離子水加到燒杯中(如果樣品含水量低，可根據(jù)基質(zhì)類型按1:3~5的比例加無離子水)，攪拌均勻。然后靜置30 min，測樣品懸液的pH值，儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。
5.3.7.3　顆粒樣品
樣品先研碎過1.0 mm試驗篩，按照5.3.7.2的方法測定。
5.4　N+P2O5+K2O含量的測定
應(yīng)符合NY 525—2002中5.3~5.5的規(guī)定。
5.5　糞大腸菌群數(shù)的測定
應(yīng)符合GB/T 19524.1—2004中的規(guī)定。
5.6　蛔蟲卵死亡率的測定
    應(yīng)符合GB/T 19524.2—2004中的規(guī)定。
5.7　As、Cd、Pb、Cr、Hg的測定
應(yīng)符合GB 18877—2002中5.12~5.17的規(guī)定。
6　檢驗規(guī)則
   本標(biāo)準(zhǔn)中產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)的數(shù)字修約應(yīng)符合GB 8170—1987的規(guī)定；產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)合格判定應(yīng)符合GB/T 1250—1989中修約值比較法的規(guī)定。
6.1　抽樣
按每一發(fā)酵罐菌液（或每批固體發(fā)酵）加工成的產(chǎn)品為一批，進(jìn)行抽樣檢驗，抽樣過程嚴(yán)格避免雜菌污染。
6.1.1　抽樣工具
無菌塑料袋(瓶)，金屬勺、抽樣器、量筒、牛皮紙袋、膠水、抽樣封條及抽樣單等。
6.1.2　抽樣方法和數(shù)量
一般在成品庫中抽樣，采用隨機(jī)法抽取。
隨機(jī)抽取5~10袋（桶），在無菌條件下，每袋（桶）取樣500 g（mL），然后將抽取樣品混勻，按四分法分裝3袋(瓶)，每袋（瓶）不少于500 g（mL）。
6.2　判定規(guī)則
6.2.1　具下列任何一條款者，均為合格產(chǎn)品。
a. 檢驗結(jié)果各項技術(shù)指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)要求的產(chǎn)品；
b. 在pH值、水分、細(xì)度、外觀等檢測項目中，有一項不符合技術(shù)指標(biāo)，而其它各項符合指標(biāo)要求的產(chǎn)品。
6.2.2　具下列任何一條款者，均為不合格產(chǎn)品。
a. 有效活菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo)；
b. 雜菌率不符合技術(shù)指標(biāo)；
c. 在pH值、水分、細(xì)度、外觀等檢測項目中，有二項以上（含）不符合技術(shù)指標(biāo)；
d. 有效養(yǎng)分含量不符合技術(shù)指標(biāo)；
e. 糞大腸菌群值不符合技術(shù)指標(biāo)；
f. 蛔蟲卵死亡率不符合技術(shù)指標(biāo)；
g. As、Cd、Pb、Cr、Hg中任一含量不符合技術(shù)指標(biāo)。
7　包裝、標(biāo)識、運輸和貯存
7.1　包裝
根據(jù)不同產(chǎn)品劑型選擇適當(dāng)?shù)陌b材料、容器、形式和方法，以滿足產(chǎn)品包裝的基本要求。
產(chǎn)品包裝中應(yīng)有產(chǎn)品合格證和使用說明書，在使用說明書中標(biāo)明使用范圍、方法、用量及注意事項等內(nèi)容。
7.2　標(biāo)識
標(biāo)識所標(biāo)注的內(nèi)容，應(yīng)符合國家法律、法規(guī)的規(guī)定。
7.2.1　產(chǎn)品名稱及商標(biāo)
應(yīng)標(biāo)明國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)已規(guī)定的產(chǎn)品通用名稱，商品名稱或者有特殊用途的產(chǎn)品名稱，可在產(chǎn)品通用名下以小1號字體予以標(biāo)注。
國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對產(chǎn)品通用名稱沒有規(guī)定的，應(yīng)使用不會引起用戶、消費者誤解和混淆的商品名稱。
企業(yè)可以標(biāo)注經(jīng)注冊登記的商標(biāo)。
7.2.2　產(chǎn)品規(guī)格
應(yīng)標(biāo)明產(chǎn)品在每一個包裝物中的凈重，并使用國家法定計量單位。標(biāo)注凈重的誤差范圍不得超過其明示量的±5%。
7.2.3　產(chǎn)品執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)
應(yīng)標(biāo)明產(chǎn)品所執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)編號。
7.2.4　產(chǎn)品登記證號
應(yīng)標(biāo)明有效的產(chǎn)品登記證號。
7.2.5　生產(chǎn)者名稱，地址。
應(yīng)標(biāo)明經(jīng)依法登記注冊并能承擔(dān)產(chǎn)品質(zhì)量責(zé)任的生產(chǎn)者名稱、地址、郵政編碼和聯(lián)系電話。進(jìn)口產(chǎn)品可以不標(biāo)生產(chǎn)者的名稱、地址，但應(yīng)當(dāng)標(biāo)明該產(chǎn)品的原產(chǎn)地（國家/地區(qū)），以及代理商或者進(jìn)口商或者銷售商在中國依法登記注冊的名稱和地址。
7.2.6　生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號
應(yīng)在生產(chǎn)合格證或產(chǎn)品包裝上標(biāo)明產(chǎn)品的生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號。
7.2.7　保質(zhì)期
用“保質(zhì)期     個月（或年）” 表示。
7.3　運輸
運輸過程中有遮蓋物，防止雨淋、日曬及高溫。氣溫低于0 ℃時采取適當(dāng)措施，以保證產(chǎn)品質(zhì)量。輕裝輕卸，避免包裝破損。嚴(yán)禁與對微生物肥料有毒、有害的其它物品混裝、混運。
7.4　貯存
產(chǎn)品應(yīng)貯存在陰涼、干燥、通風(fēng)的庫房內(nèi)，不得露天堆放，以防日曬雨淋，避免不良條件的影響。